PERFILES DE DNA POR MICROSATELITES (SHORT TANDEM REPEAT), PRUEBAS DE PATERNIDAD.
Los perfiles de DNA nos permiten
comparar el DNA procedente de diferentes muestras y/o sujetos y definir
su grado de similitud. En los últimos años estos
análisis, gracias a los adelantos en las tecnologías
involucradas, han tenido gran aplicación en diferentes campos:
forense, para pruebas de paternidad o bien criminalisticas, en la
confirmación de pedigrí de animales de raza, así
como en la evaluación de analogías filogenéticas
en general.
En la aplicación forense las metodologías basadas en la
amplificación de los microsatélites (STR) han sobresalido
gracias a ciertas características que las hacen únicas:
pequeñas cantidades de muestra son generalmente suficientes para
el ensayo, son una fuente muy grande de marcadores de polimorfismo y
además se cuenta con bases de datos poblacionales que indican la
frecuencia con la cual cada alelo aparece en las distintas razas.
Una gran cantidad de nuestro DNA es idéntico entre los
individuos pero existen ciertas regiones que varían de persona a
persona, a estas variaciones en las secuencias de DNA entre individuos
se les denomina polimorfismo.
Fundamento de la prueba
Por medio de la PCR y el uso de primers locus específicos se amplifican los siguientes Loci:
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Multiplex
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Loci
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Rango
en tamaño de bases
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STR
marcadores alelicos N. De repeticiones
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FFv Triplex
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F13A01
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283-331
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1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16
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FESFPS
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222-250
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7,8,9,10,11,12,13,14
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vWA
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139-167
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13,14,15,16,17,18,19,20
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SilverSTR® III Triplex
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D16S539
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264-304
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5,8,9,10,11,12,13,14,15
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D7S820
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215-247
|
6,7,8,9,10,11,12,13,14
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D13S317
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165-197
|
7,8,9,10,11,12,13,14,15
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Monoplex
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Loci
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Rango
en tamaño de bases
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STR
marcadores alelicos N. De repeticiones
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F13B
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169-189
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6,7,8,9,10,11
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HPRTB
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259-303
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6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17.
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LPL
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105-133
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7,8,9,10,11,12,13,14
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La probabilidad de que un perfil genético se repita utilizando el conjunto de loci es de:
1 en 3,350,000 individuos en la población hispano americana
1 en 2,360,000 individuos en la población caucásico americana
1 en 3,260,000 individuos en la población afro americana
El producto de la amplificación se separa por
electroforésis en gel de poliacrilamida, se revela con
tinción de plata y las bandas de las muestras se comparan versus
los marcadores alélicos.
Toma de muestra
Sangre completa con EDTA o Citrato de Sodio, volumen mínimo 500ml.
Evitar tomar muestras con hisópo bucal ya que el contenido de
células puede variar debido a muestreo ineficiente o a factores
externos como el tabaquismo. Utilizar únicamente material
estéril y desechable, posiblemente vacutainers.
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